来源：CPhI制药在线　2020-09-02A-A+
作者 | 小泥沙

美国当地时间8月15日，美国国家食品和药物管理局（FDA）发布了一项紧急授权，允许公众使用一项基于唾液的新型冠状病毒(COVID-19)检测方法，该方法取名为SalivaDirect，由耶鲁大学公共卫生学院开发。这是美国FDA继4月13日紧急授权通过罗格斯大学的RUCDR infinite Biologics及其合作方的唾液检测法的第五种基于唾液的新冠病毒检测方法。

使用SalivaDirect方法检测新冠病毒，被测试者只需要将自己的唾液装入一个无菌器皿，然后医务人员在这个装有唾液的器皿中添加一种特殊试剂，最后对其进行加热，释放病毒基因组，24小时内就能获得检测结果。省去了繁琐而昂贵的RNA提取步骤，SalivaDirect方法能让人们更快获得检测结果，而且价格更便宜。不过和其他使用RNA提取设备的检测方法相比，SalivaDirect方法的敏感性稍差。

无独有偶，继美国耶鲁大学后，以色列医疗机构希巴医疗中心（Sheba Medical Center）近日也公开了一种新型冠状病毒"唾液检测法"，该检测方法用时不到1秒，准确率高达95%，成本也更低。使用该方法检测，测试对象仅需将主要成分为生理盐水的漱口水倒入嘴中，漱口后再吐回试剂瓶即可。然后，检测人员将样本放入检测器，并连接计算机进行测试。测试结果可以在不到1秒的时间内在电脑屏幕上显示出来。该方法主要是针对测试对象的唾液进行光谱分析，因此检测设备仅需一个比手掌稍大一点的盒子。连接电脑后，基于前期累计的大量数据和人工智能分析，检测算法能够及时给出结果。初步临床试验显示，"唾液检测法"的准确率达到了95%。

相较于"唾液检测法"，核酸检测依然是新型冠状病毒感染确诊的"金标准"。目前针对新型冠状病毒的治疗依然尚无特效药，早确诊、早隔离、早治疗是防止该病扩散和提高治愈率的关键。核酸检测在新冠肺炎诊断过程中发挥着重要作用，目前新型冠状病毒常用实验室检测项目主要是核酸和抗体检测。

核酸检测

新型冠状病毒核酸检测是一种病原学检测手段。核酸是所有已知生命体必不可少的组成物质，每一物种都有独特的核酸序列，运用特殊手段针对新冠病毒核酸的特征序列检测到新冠病毒的核糖核酸(RNA)，就可以确定是新冠病毒感染。核酸诊断方法使用的样本来源多样，有口腔拭子、咽喉拭子、鼻拭子、唾液、肺泡灌洗液、血液、尿液和粪便或直肠拭子。基于SARS-CoV的研究发现，不同来源样品检测结果差异较大。其中取自下呼吸道的标本，如肺泡灌洗液，检测效果最好，从取材方便程度和阳性率综合考虑，咽喉拭子是最为优选的采样方法。目前国家药品监督管理局已批准的2019-nCoV核酸诊断试剂盒应用的方法有荧光PCR 法、联合探针锚定聚合测序法和恒温扩增法。此外，一些新的实验室诊断方法也在开发中，如基于Cas核酸酶的诊断法和纳米孔测序法等。

核酸检测能够检测到处于窗口期的患者，可以及早发现感染者，并且适用于大规模人群筛查。核酸检测阳性是新冠病毒感染确诊的"金标准"，但核酸检测阴性不能排除新冠病毒感染，期间可能因样本质量差，如口咽等部位的呼吸道样本，样本采集得过早或过晚，没有正确地保存、运输和处理样本，以及技术本身存在的原因，如病毒变异、PCR 抑制等原因导致"假阴性"。

抗体检测

血清学诊断通常以待检人群血清为样本，通过检测抗原或抗体来诊断病原。常用的方法有免疫吸附试验（包括ELISA 和核酸适配体免疫吸附试验）、胶体金试纸条、间接免疫荧光和病原分离，以及基于ELISA开发的电化学发光ELISA和磁微粒化学发光ELISA。其中，磁微粒化学发光法是国家药品监督管理局目前已批准的两款2019-nCoV血清学诊断试剂盒应用的方法。该法的原理是在免疫吸附试验的基础上，利用磁纳米微粒技术在磁场的作用下富集酶标抗体标记的抗原-抗体复合物，然后再加入酶促化学发光底物产生光学信号，通过具有光量子检测功能的酶标仪检测。与传统ELISA 相比，该法灵敏度高，特异性强，线性检测范围更宽，试剂更稳定，自动化操作程度更高。

新冠病毒抗体是病毒入侵人体后，刺激人体免疫细胞生成具有保护作用的免疫球蛋白。利用抗原和抗体特异性结合的原理，通过标记的特异性抗原检测新冠病毒抗体。通过检测患者血液中新冠病毒IgM 和IgG 抗体，有助于临床医生判断患者所处病毒感染的时期。IgM 抗体产生于病毒感染后5～7天，一般持续2～3周，属于急性感染期。IgG 抗体产生于病毒感染10～15 天，可持续数月甚至长期存在，属于感染中后期或既往感染。抗体检测可以用于对核酸检测结果存疑，或无法使用RT-PCR 时的辅助诊断，可以回顾性诊断，或流行病学研究，了解人体免疫状态，还可以指导新冠病毒疫苗使用。抗体检测阴性也不能排除新冠病毒感染，抗体检测可能会因为标本中存在干扰物质(如类风湿因子、嗜异性抗体、补体、溶菌酶等)、标本溶血、标本被细菌污染、标本凝固不全残留有纤维蛋白原等因素影响而出现"假阳性"结果。同时，由于血清学方法存在一定的窗口期以及检测试剂盒灵敏度不同，也会出现"假阴性"结果。

核酸和抗体联合检测

与单一检测手段相比，核酸和抗体联合检测是新冠病毒的有效检测手段，但核酸和抗体检测结果依然不能作为新型冠状病毒肺炎确诊和排除的唯一依据，应结合患者流行病学史、临床症状和其他实验室检查结果综合判断。核酸检测病毒的核糖核酸(RNA)，是病毒存在的直接证据，抗体检测的是患者血液中被刺激产生的特异性抗体，是间接证据。当核酸检测阴性时，增加抗体检测，可以弥补核酸检测容易漏诊的缺点。核酸检测用于检测受试者是否携带病毒，而抗体检测用于核酸检测结果阴性的疑似患者的补充检测，或疑似病例诊断时与核酸联合检测。一个用于疾病的鉴别诊断，确保"不错"，一个用于疾病的筛查，确保"不漏"，二者联合检测，综合判读，可以提高新冠病毒阳性检出率，减少社会传播风险。

核酸联合抗体检测结果临床判断

新型冠状病毒作为一种传染性极强和危害性极大的病原，已致使大量人员出现发热、咳嗽和肺炎等症状，甚至死亡，同时给全球带来重大的经济损失。为抑制2019-nCoV的传播扩散，以及使潜伏期患者尽早得以救治，快速有效的早期诊断技术成为了战胜疫情的关键。

参考资料：

[1] 碾压美国技术！以色列"唾液检测法"1秒内就能出结果 成本低至0.25美元

[2] 廖亚金,易成功,彭志鑫,廖洋,袁增强.新型冠状病毒诊断技术展望[J].军事医学,2020,44(04):258-263+268.

[3] 岳新杰. 新冠病毒检测知多少之一[N]. 上海中医药报,2020-07-24(003).

[4] [岳新杰. 新冠病毒检测知多少之二[N]. 上海中医药报,2020-07-31(003).